1测定原理

过氧化氢酶活性的测定，用高锰酸钾来滴定土壤和过氧化氢作用后剩余的过氧化氢的量，根据高锰酸钾的浓度和体积及过氧化氢的浓度求得过氧化氢的体积，再据反应前后过氧化氢的体积求得过氧化氢的消耗量，即表示过氧化氢酶活性。过氧化氢酶活性以lg土消耗0.1mol?L]KMn04毫升数来表示反应方程式如下：

2KMn04+5H202+3H2S04—?2MnS04+K2S04+8H20+502

2实验步骤

称取2g过lmm筛的风干土样(2份作为平行)，置于150ml三角瓶中，加入40ml蒸馏水和20ml0.3%过氧化氢溶液，将三角瓶置于120r?min_1往返摇床上，振荡悬液30min，振荡结束后立即加入20ml1.5mol-L1的H2S04，使未分解的过氧化氢稳定，并用致密滤纸过滤。

吸取20ml滤液于100ml三角瓶中，用0.1mol?L―1的高锰酸钾溶液滴定至微红色，且30秒钟不褪色即达终点，记录消耗量。同时设置无土注：因高锰酸钾溶液浓度容易发生变化，故在每次测定时，必须用草酸钠标准溶液标定。标定方法：吸取10ml0.1mol?L1草酸钠标准溶液于200ml三角瓶中，并加蒸馏水至80ml左右，投入几粒玻璃球，再加5ml1:3硫酸酸化，在电炉上加热煮沸2分钟，取下稍冷，趁热(70-801C)用高锰酸钾溶液滴定，滴至微红色，且30秒钟不褪色即达终点，记下消耗高锰酸钾的毫升数V，SP：

高锰酸钾滴定度的校正值T=10/V

结果计算：M=(V2-V,)T/g

式中：M为过氧化氢酶活性值

乂2为对照试验所消耗的高锰酸钾毫升数

V,为样品试验所消耗的高锰酸钾毫升数

g为样品重量克数

土壤酶的作用与意义

蔗糖酶：蔗糖酶是根据其酶促基质——蔗糖而得名的。[wWw.niuBB.Net]又叫转化酶。它对增加土壤中易溶性营养物质起着重要的作用。研究证明，蔗糖酶与土壤许多因子有相关性。如与土壤有机质、氯、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度有关。一般情况下，上壤肥力越商，蔗糖酶活性越强。它不仅能够表征土壤生物学活性强度，也可以做为评价土壤熟化程度和上壤肥力水平的一个指标。

纤维素酶：纤维素是短物残体进入土壤的碳水化合物的重要组分之一：在纤维素酶作用下。它的最初水解产物是纤维二糖。在---作用下，纤维二糖分解成葡萄糖。所以，纤维素酶是碳循环中的一个重要酶。

脲酶：脲酶广泛存在于土壤中，是研究得比较深入的一种酶。脲酶酶促产物——氨是植物氮源之—。尿素氮肥水解与脲酶密切相关。有机肥料中也有游离脲酶存在。同时，脲酶与土壤其他因子(有机质含量、微生物数量)有关。研究土壤脲酶转化尿素的作用及其调控技术，对提高尿素氮肥利用率有重要意义。

蛋白酶：蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化。它们的水解产物是高等植物的氮源之一。土壤蛋白酶在剖面中的分布与蔗糖酶相似，酶活性随剖面深度而减弱。并与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

脱氢酶：脱氢酶能酶促脱氢反应，它起着氢的中间传递体的作用。在土犊牛，碳水化合物和有机酸的脱氢酶作用比较活跃，它们可以做为氢的供体。脱筋能自基质中析出氢而进行氧化作用。

硝酸盐还原酶：硝酸还原酶和亚硝酸还原酶能酶促土壤硝态氮还原成氨。测定这些酶可了解土墩氮素转化中脱氮作用强度。硝酸还原酶还参与土壤中铁酌还原作用。

过氧化氢酶：过氧化氢酶广泛存在于土壤中和生物休内。土壤过氧化氢酶促过氧化氢的分解有利于防止它对生物体的毒害作用。过氧化氢酶活性与土壤有机质含量有关，与微生物数量也有关。一般认为土壤催化过氧化氢分解的活性，有30%或40%以上是耐热的，即非生物活性，常由锰、铁引起催化作用。土壤肥力因子与不耐热的即过氧化氢酶活性成正比例。